产地 | 上海 |
保存条件 | 密封于-20度阴凉干燥环境 |
品牌 | DUMABIO |
货号 | 电询 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 电询 |
保质期 | 2年 |
适应物种 | 电询 |
检测限 | 电询 |
数量 | 1000 |
包装规格 | 1mg |
标记物 | 无 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
鸡丝氨酸蛋白酶8(PRSS8)ELISA试剂盒
ELISA的样本实验准备
1.在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的, -71℃冻存备用。标本
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
此套件的交货时间为2-3天。
*保存温度:2 - 8 C。
*保质期:6个月。
*国内快递.
凡在本公司购买ELISA试剂盒,可提供免费待测服务,视样本数量而定出结果时间,一般一周内出检测结果!
问:酶标包被版是酶标板吗?
答:是的
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