兔上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78)酶联免疫试剂盒
- 起订量 (盒)价格
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1-2¥1890 /盒
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≥2¥1680 /盒
- 发布日期: 2024-09-26
- 更新日期: 2024-10-09
产品详请
产地 |
上海
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保存条件 |
密封于-20度阴凉干燥环境
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品牌 |
DUMABIO
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货号 |
电询
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用途 |
科研实验
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检测方法 |
电询
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保质期 |
2年
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适应物种 |
电询
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检测限 |
电询
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数量 |
1000
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包装规格 |
1mg
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标记物 |
无
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样本 |
电询
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应用 |
科研实验
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是否进口 |
否
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兔上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78)酶联免疫试剂盒
上海笃玛生物科技有限公司ELISA试剂盒采用原装进口抗体,一步孵育,一步洗板,操作时间仅需90分钟,就能得到准确的实验结果。刚开起的酶联板孔会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响,您尽可放心使用。本司专业研发各种种属ELISA试剂盒
一、操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
二、效果测定
测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
⑴ 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有抗体活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA方法进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标抗体的使用浓度。
⑵ 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:
酶量(mg/ml)=OD403×0.42
IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62
对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量,按下列公式计算:
IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62
已知酶量和IgG量后,即可计算出标记抗体的摩尔(mol)比值。
HRP/IgG摩尔比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4
结合物中酶总量=HRP(mg/ml)×结合物溶液量
结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×
用于ELISA的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果较好,达 1000(g/ml时效果 。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果较好,1.5-2.0时 。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%较好,达30%以上时 。
三、结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
四、免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。
严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
五、本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
此套件的交货时间为2-3天。
*保存温度:2 - 8 C。
*保质期:6个月。
*国内快递.
凡在本公司购买ELISA试剂盒,可提供免费待测服务,视样本数量而定出结果时间,一般一周内出检测结果!
发表刊物 影响因子 奖励金额
SCI期刊杂志 1.0≤1F<3.0 200元
SCI期刊杂志 3.0≤1F<6.0 400元
SCI期刊杂志 6.0≤1F<10.0 600元
SCI期刊杂志 1F≥10 1000元