产地 | 上海 |
保存条件 | 密封于-20度阴凉干燥环境 |
品牌 | DUMABIO |
货号 | 电询 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 电询 |
保质期 | 2年 |
适应物种 | 电询 |
检测限 | 电询 |
数量 | 1000 |
包装规格 | 1mg |
标记物 | 无 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
兔早期生长应答蛋白1(EGR1)酶联免疫试剂盒
公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类上万种产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。
特性操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注意事项
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是 加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
笃玛代测服务:
技术服务内容: 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
寄标本时需注明以下情况:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;4、联系方式;5、实验后标本是否寄回。
结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:
酶量(mg/ml)=OD403×0.42
问:做出来的结果:标准品的吸光度呈线性回归,但是样品的吸光度都和本体吸光度值接近,正常未予干预的大鼠血浆都基本没有5-HT 表达,这是什么原因?(大鼠5羟色胺(5-HT)Elisa试剂盒
答:原因是:样本、稀释、室控和机器操作等,原因都可能造成吸光度都和本体吸光度值接近,