兔轴突生长诱向因子1(Ntn1)酶联免疫试剂盒

ELISA 实验步骤：

1.包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC过夜，洗净。

2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净。

3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净。

4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净。

5.显色：TMB显色

A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.

B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。

终止液：2N硫酸

A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴。

6.450nm 波长测OD值

一、ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型：一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA，即我们通常所指的ELISA（微量板ELISA）；另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA，称为斑点ELISA（Dot-ELISA）；再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA，称为布ELISA（C－ELISA）。在微量板ELISA中，又根据其性质不同分为间接ELISA、双抗体夹心ELISA、双夹心ELISA、竞争ELISA、阻断ELISA及抗体捕捉ELISA。

二、间接ELISA

问：我想问一下，标准品浓度与标准品吸光度值之间是不是线性回归？检测出来的吸光度值很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左 右 ？（大鼠5羟色胺（5-HT）Elisa试剂盒

答：是线性回归。检测出来的值比较低 ，样本、稀释、操作等，原因很多，但只要在可操作范围就行