兔聚集蛋白聚糖(AGC)酶联免疫试剂盒

双抗体夹心
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡病毒（IBDV）的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。
① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
双夹心ELISA
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种抗体，还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为：
① 加抗体（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加用非同种动物生产的特异性抗体（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加入酶标抗Ab-2抗体（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。

酶联免疫(ELISA)是如今检验科常用的免疫学检测方法之一，其操作简单，无须特殊设备，使其在各级医院都有应用。但是，如果忽视了影响其结果的因素，难免会造成假阴性或假阳性，因此，了解影响实验的因素，减少差错事故的发生是极其必要的。
素质因素
实验室人员的素质主要包括五个方面：思想素质、文化素质、技术素质、心理素质、身体素质。首先应具备一个良好的思想素质，因为我们的服务对象是人，我们的道德水平直接关系到人们的健康和生命安危，如果马马虎虎。三心二意，难免会有差错事故发生，我们应该热爱专业，耐心细致。在工作中如标本混淆、张冠李戴、报告单发错等都有可能造成严重后果；其次文化素质和技术素质，我们要熟练掌握本专业的基本理论和基本技术，认真学习新理论新知识，努力提高自己的业务水平，创造一个能够胜任本职工作的技术平台。良好的心理素质就是要勇于面对工作生活中的挫折，在繁忙工作中，有条不紊，冷静沉着的处理有关事务。人员素质问题是影响检验结果的首要因素。

自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱

试剂盒组成
名称                96 孔配置         48 孔配置            备注
微孔酶标板       12 孔×8 条        12 孔×4 条          无
标准品              0.5mL               0.5mL             按说明书进行稀释
标准品稀释液      6mL                 3mL              按说明书进行稀释
样本稀释液         6mL                 3mL              按说明书进行稀释
检测抗体-HRP     6mL                 3mL                 无
20×洗涤缓冲液    20mL               20mL             按说明书进行稀释
底物 A              6mL                 3mL                  无
底物 B              6mL                 3mL                  无
终止液              6mL                 3mL                   无
封板膜              2 张                 2 张                  无
说明书              1 份                 1 份                  无
自封袋              1 个                 1 个                  无

布ELISA
（C－ELISA） C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即涤纶布为固相载体，这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大，可为免疫反应提供较大的表面积，提高反应的敏感性，且容易洗涤，不需特殊仪器等优点。其基本原理与Dot-ELISA类似，只是载体不同。以对布氏杆菌抗原的检测为例，C－ELISA的主要程序为：
⑴ 首先把抗布氏杆菌的血清包被（吸附）在聚脂布上，并经洗涤及封闭；
⑵ 加被检样品并于室温下感作30分钟，然后洗5次；
⑶ 加酶标记的抗布氏杆菌抗体，于室温下感作30分钟，然后洗涤5次；
⑷ 加入底物液显色；
⑸ 测定OD值。