产品展厅
兔鸟苷酸激酶1(GUK1)酶联免疫试剂盒
起订量 (盒)价格
1-21890 /盒
≥21680 /盒
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:1mg
  • 货号:电询
  • 发布日期: 2024-09-24
  • 更新日期: 2024-10-09
产品详请
产地 上海
保存条件 密封于-20度阴凉干燥环境
品牌 DUMABIO
货号 电询
用途 科研实验
检测方法 电询
保质期 2年
适应物种 电询
检测限 电询
数量 1000
包装规格 1mg
标记物
样本 电询
应用 科研实验
是否进口



兔鸟苷酸激酶1(GUK1)酶联免疫试剂盒 


上海笃玛生物科技有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有竞争力的价格。


一、本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:
① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→37℃ 60分钟后置4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗原 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

二、组成与操作流程

一个完整的CENPH ELISA Kit通常包括以下几个部分:酶标板、标准品、抗体、酶标试剂、显色剂、终止液以及必要的实验耗材。在使用时,首先需要将标准品和待测样本加入酶标板中,然后依次加入特定的抗体和酶标试剂,进行孵育和洗涤等操作, 加入显色剂进行显色反应,并通过酶标仪读取结果。整个操作流程简便快捷,且具有较高的可重复性和准确性。

三、操作步骤
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。


四、效果测定
测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
⑴ 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有抗体活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA方法进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标抗体的使用浓度。
⑵ 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:
酶量(mg/ml)=OD403×0.42
IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62
对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量,按下列公式计算:
IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62
已知酶量和IgG量后,即可计算出标记抗体的摩尔(mol)比值。
HRP/IgG摩尔比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4
结合物中酶总量=HRP(mg/ml)×结合物溶液量
结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×
用于ELISA的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般,为500(g/ml时效果较好,达 1000(g/ml时效果 。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠,所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般,1.0时效果较好,1.5-2.0时 。酶结合率为 7%时效果一般,为9%-10%较好,达30%以上时 。
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA,即我们通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA,称为斑点ELISA(Dot-ELISA);再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA,称为布ELISA(C-ELISA)。在微量板ELISA中,又根据其性质不同分为间接ELISA、双抗体夹心ELISA、双夹心ELISA、竞争ELISA、阻断ELISA及抗体捕捉ELISA。






五、1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是 加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。


什么样的检验要求?要出示什么吗?
怎样算是处理过?还是就只是离心保存?
答:离心保存,检验要求,就是标本标号,和特殊要求
问:测好多指标 血清不分开可以么?
答:要分开,分好后,分别标上序列号,便于实验好区分。

新闻资讯
  • 中秋迎好礼 中秋迎好礼 随着国产3A大作《黑神话:悟空》的面世,现我司推出活动。 从即日起至2024年9月18日,购买ELISA试剂盒满五盒,即可申领《黑神话:悟空》数字标准版兑换码。 ... VIEW DETAILS
  • 化学实验室守则小分享 一、实验前 在进行化学实验前,学生必须完成预习工作,了解实验的目的、步骤和注意事项。进入实验室前,应穿着适当的防护装备,如实验服、护目镜、实验手套等。此外,学生应提... VIEW DETAILS
  • 犬肾素(REN)ELISA试剂盒在宠物健康监测中的重要作用 随着宠物健康管理的日益受重视,犬肾素(REN)ELISA试剂盒在宠物健康监测中发挥着不可或缺的作用。 犬肾素作为一种关键的激素,其水平的变化能够反映犬只肾脏的功能状态。而犬肾素(REN)ELISA试... VIEW DETAILS
  • 上海笃玛生物科技有限公司2024年春节放假通知 尊敬的新老客户: 您好! 2024年春节即将到来,上海笃玛生物科技有限公司全体员工提前恭祝广大新老客户,新春快乐、生意兴隆、万事如意!非常感谢您长期以来对我们工作的理解... VIEW DETAILS
  • 科研基础小知识分享,细胞传代 一、什么是细胞传代? 细胞传代是细胞培养过程中的一项基本技术,是指将培养的细胞在一定的条件下进行分离、再培养的过程。传代过程中,细胞会逐渐生长,并填满整个培养容器,因此需要进... VIEW DETAILS
  • ELISA样品制备&收集指南 一、引言 酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种广泛应用于生物学和医学研究的免疫分析方法。该方法通过将抗原或抗体固相化在载体表面,实现对目标分子的捕获和检测。在进行ELISA实验之前,... VIEW DETAILS
联系方式
手机:15214367449
Q Q:
微信扫一扫