猴冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒

在细胞生物学研究中扮演着至关重要的角色，特别是在细胞有丝分裂和染色体分离的过程中。近年来，随着对CENPH功能的深入研究，科学家们越来越需要一种高效、准确且可靠的实验工具来检测和分析这一蛋白的表达和活性。为此，应运而生，为相关研究领域提供了强大的技术支持。

一、操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。


二、组成与操作流程

一个完整的CENPH ELISA Kit通常包括以下几个部分：酶标板、标准品、抗体、酶标试剂、显色剂、终止液以及必要的实验耗材。在使用时，首先需要将标准品和待测样本加入酶标板中，然后依次加入特定的抗体和酶标试剂，进行孵育和洗涤等操作， 加入显色剂进行显色反应，并通过酶标仪读取结果。整个操作流程简便快捷，且具有较高的可重复性和准确性。

三、应用领域

试剂盒在多个领域具有广泛的应用前景。首先，在细胞生物学研究中，科学家们可以利用该试剂盒检测不同细胞系或不同处理条件下CENPH蛋白的表达水平，进而揭示其在细胞周期调控和染色体分离等方面的作用机制。其次，在临床医学领域，该试剂盒可以诊断和预后评估等方面。

四、不同研究领域对应的指标：
研究方向 检测指标
细胞 IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-6、IL-10、IL-15、IL-21、Granzyme B 、GM-CSF、BCMA、IDO、HGF……
感染/IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、GM-CSF、CRP、IFN-β、IL-10、IL-18、MCP-1、FGF-19……
免疫/自免 IL-4、IL-5、IL-6、IL-12p70、IL-13、IL-17、IL-18、IL-21、IL-23、CXCL1、MMP-9、TNF-α、GM-CSF、G-CSF……
PD-1、PD-L1、VEGF、VEGFR2、BCMA、TGF-b、FGF-19、PDGF-BB、HGF、CD25、CD28……
心 ST2、PCSK9、ACE2、HGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-BB、ANGPTL3、GH、CRP……
 Insulin、Glucagon、Leptin、C-peptide、HGF、ACE2、VEGF、CRP……
神经科 BDNF、b-NGF、Neuropilin-1、ACE2、TGF-β1、VEGF、IL-8、MMP-9、Leptin……

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪（TGE）、猪伪（PR）及猪胸膜（AP）的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序：
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。