牛蛋白激酶C-ε(PKCε)ELISA试剂盒

双夹心ELISA
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种抗体，还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为：
① 加抗体（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加用非同种动物生产的特异性抗体（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加入酶标抗Ab-2抗体（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。

不同研究领域对应的指标：
研究方向 检测指标
细胞 IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-6、IL-10、IL-15、IL-21、Granzyme B 、GM-CSF、BCMA、IDO、HGF……
感染/ IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、GM-CSF、CRP、IFN-β、IL-10、IL-18、MCP-1、FGF-19……
免疫/自免 IL-4、IL-5、IL-6、IL-12p70、IL-13、IL-17、IL-18、IL-21、IL-23、CXCL1、MMP-9、TNF-α、GM-CSF、G-CSF……
 PD-1、PD-L1、VEGF、VEGFR2、BCMA、TGF-b、FGF-19、PDGF-BB、HGF、CD25、CD28……
心 ST2、PCSK9、ACE2、HGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-BB、ANGPTL3、GH、CRP……
 Insulin、Glucagon、Leptin、C-peptide、HGF、ACE2、VEGF、CRP……
神经科 BDNF、b-NGF、Neuropilin-1、ACE2、TGF-β1、VEGF、IL-8、MMP-9、Leptin……

凡在本公司购买ELISA试剂盒，可提供免费待测服务，视样本数量而定出结果时间，一般一周内出检测结果！

自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱

操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。