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兔内脂素(VF)ELISA试剂盒
  • 品牌:DM
  • 产地:上海
  • 货号:DM-R14109
  • 发布日期: 2024-08-08
  • 更新日期: 2024-10-09
产品详请
产地 上海
保存条件 -2.8℃
品牌 DM
货号 DM-R14109
用途 科研与实验
检测方法 吸附测定法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 1000
包装规格 96T/48T
标记物 电询
样本 血清,细胞,细胞上清液、体液等
应用 科研试剂
是否进口


兔内脂素(VF)ELISA试剂盒

一、 实验原理

是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人胰岛素受体α(INSRA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素受体α(INSRA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

二、操作步骤 
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

三、产品优势

1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、操作简便、稳定性好。

2. 特异性强:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3. 重复性好:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

4. 同城(上海)需要代测可免费上门取样,享送货上门服务。

5. 根据客户需求定制elisa试剂盒并提供免费代测服务。

6. 臻科生物可提供专业技术服务,全方位为您解决实验进程中所遇到一切实验问题。

四、ELISA试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1个

1个


酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:36U/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)



五、试剂盒组成
名称                96 孔配置         48 孔配置            备注
微孔酶标板       12 孔×8 条        12 孔×4 条          无
标准品              0.5mL               0.5mL             按说明书进行稀释
标准品稀释液      6mL                 3mL              按说明书进行稀释
样本稀释液         6mL                 3mL              按说明书进行稀释
检测抗体-HRP     6mL                 3mL                 无
20×洗涤缓冲液    20mL               20mL             按说明书进行稀释
底物 A              6mL                 3mL                  无
底物 B              6mL                 3mL                  无
终止液              6mL                 3mL                   无
封板膜              2 张                 2 张                  无
说明书              1 份                 1 份                  无
自封袋              1 个                 1 个                  无

六、操作步骤

1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

3. 弃掉板内液体,洗板3次

4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

6. 每孔加入50μL终止液

7. 立即在450nm波长下读数,处理数据


七、实验结果计算



以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。






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