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产地 | 上海 |
保存条件 | -2.8℃ |
品牌 | DM |
货号 | DM-R14109 |
用途 | 科研与实验 |
检测方法 | 吸附测定法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | 猪 |
数量 | 1000 |
包装规格 | 96T/48T |
标记物 | 电询 |
样本 | 血清,细胞,细胞上清液、体液等 |
应用 | 科研试剂 |
是否进口 | 否 |
兔内脂素(VF)ELISA试剂盒
一、 实验原理
是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人胰岛素受体α(INSRA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素受体α(INSRA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
二、操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
三、产品优势
1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、操作简便、稳定性好。
2. 特异性强:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性好:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
4. 同城(上海)需要代测可免费上门取样,享送货上门服务。
5. 根据客户需求定制elisa试剂盒并提供免费代测服务。
6. 臻科生物可提供专业技术服务,全方位为您解决实验进程中所遇到一切实验问题。
四、ELISA试剂盒组成
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
说明书 |
1份 |
1份 |
|
封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
密封袋 |
1个 |
1个 |
|
酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
标准品:36U/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
说明书 |
1份 |
1份 |
|
封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
五、试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置 备注
微孔酶标板 12 孔×8 条 12 孔×4 条 无
标准品 0.5mL 0.5mL 按说明书进行稀释
标准品稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 6mL 3mL 无
20×洗涤缓冲液 20mL 20mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2 张 2 张 无
说明书 1 份 1 份 无
自封袋 1 个 1 个 无
六、操作步骤
|
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
|
2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 |
|
3. 弃掉板内液体,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
|
6. 每孔加入50μL终止液 |
|
7. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
七、实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
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