抗凝马血（无菌 pet瓶装）

用法

血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体,摇均匀后放置 10-30 分钟待结块蛋白质沉底后即可 使用。

注意事项

有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或 4 ℃ 冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。

抗凝马血(无菌 袋装) 的解冻:

将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从 -20 ℃ 进入 37 ℃ 解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于 2 ~ 8 ℃ 区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如 37 ℃ ),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物,主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但这些析出物,并不影响血清本身的质量。 若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

注意须知（仅供参考）：
1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。

2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。

3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。

4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。

5.产品有效期，检定合格之日起有效期5年。

鉴别方法：
血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反响被激活，血液敏捷凝结，构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清，也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中，纤维蛋白原转成为纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆 大的差异。而在凝血反响中，血小板开释出很多物质，各也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变，如原成为，并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰，血液中很多化学成分的剖析，都以血清为样品。

抗凝马血的主要作用：

●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（*******、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在过程中起重要作用。

●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。

因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用，如SeO3,硒等。

抗凝马血（无菌 pet瓶装）

血清的主要成分

血清使血浆出去纤维蛋白原而形成的一种和复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素以及无机物等,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用,且血清成分及其含量常随动物的性别、年龄、生理条件和营养条件的不同而异。它主要由水和各种化学成分组成,包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶等。

血清保存应该注意以下几点：
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.

(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.

(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

(5)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.

(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.

公司产品仅用于科研
对于血清的成分的研究,仍然存在一些未解之谜:
1.血清的成分复杂,可能有几百种之多,对其准确的成分、含量及作用尚且不清,尤其是一些多肽生长类因子、激素和脂类等。
2.血清都是批量 ,各批量之间差异很大,且保存期一般不超过一年,因此要保证每批血清的相似性几乎不太现实;
3.不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中”的原因之一。

质量标准

血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。

1． 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。

2． 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。

3． 证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。

4． 血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。

5． 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。

6． 对细胞有良好的支持繁殖作用。

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