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双夹心ELISA
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种抗体，还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为：
① 加抗体（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加用非同种动物生产的特异性抗体（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加入酶标抗Ab-2抗体（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。
竞争ELISA
此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为：
① 抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
④ 用ELISA检测仪测定OD值。
被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定，如果待检溶液中抗原越多，被结合的标记抗原的量就越少，有色产物就减少，这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特异性高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测；其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记，而且因为抗原的结构不同，还需应用不同的结合方法。此外，试验中应用酶标抗原的量较多。
阻断ELISA
本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪（TGE）、猪伪（PR）及猪胸膜（AP）的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序：
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。
本试验同时设标准阴、阳性血清对照、兔抗AP2型阳性对照、空白对照。

细胞培养技术自20世纪50年代问世以来，经过70年的发展，已经成为一门融细胞生物学、免疫学、生理学、病理学、生物化学、营养学及生物工程技术为一体、结合组织工程等前沿领域的新兴学科。细胞培养技术不仅在生命科学研究中有重要地位，在生物工程领域中，细胞培养技术更是被誉为现代生物工程之母。细胞培养技术广泛应用于医药研究、细胞生产、生物制品制备、药物筛选、毒理学研究、动植物检疫以及航天和国防等领域。

一、细胞培养在医学领域的应用

细胞培养技术在医学领域的应用主要涉及药物筛选、药物毒理学研究、研究以及干细胞等方面。

1. 药物筛选和毒理学研究

在药物筛选和毒理学研究中，细胞培养技术扮演着重要的角色。通过体外培养细胞，可以模拟体内环境，对药物进行筛选和评估，同时也可以研究药物对细胞的毒性作用。利用细胞培养技术，可以快速、准确地检测药物的和安全性，为新药研发提供有力支持。

2.Tumour 研究

细胞的培养为Tumour研究提供了重要的工具。通过Tumour细胞培养，可以深入了解Tumour细胞的生长特性、侵袭能力以及抗药性等方面的信息，为Tumour的诊断和提供依据。同时，Tumour细胞培养也为物的筛选和开发提供了实验模型。

3. 干细胞

干细胞培养是干细胞的重要环节。通过体外培养干细胞，可以获取足够的干细胞用于移植。目前，干细胞已经在的中取得了一定的成果，如、、等。干细胞培养为这些疾病的提供了新的途径。

二、细胞培养在生物工程领域的应用

细胞培养技术在生物工程领域的应用主要涉及动物细胞大规模培养、植物组织培养以及微生物培养等方面。

1. 动物细胞大规模培养

动物细胞大规模培养技术是生物工程领域的重要分支之一。通过动物细胞大规模培养，可以生产出各种生物制品，如干扰素、生长因子、激素等。这些生物制品在医疗、农业和工业等领域有广泛的应用。动物细胞大规模培养技术已经成为生物工程领域的重要支柱产业之一。

2. 植物组织培养

植物组织培养是植物繁殖和基因转移的重要手段之一。通过植物组织培养，可以快速繁殖植物，实现植物的快速生长和育种。此外，植物组织培养还可以用于基因转移和基因编辑等方面，为植物育种和基因工程提供有力支持。

3. 微生物培养

微生物培养是生物工程领域中的一项基础技术。通过微生物培养，可以生产出各种生物制品，如抗生素、酶制剂等。微生物培养技术已经成为工业微生物学和生物工程领域的重要支柱产业之一。

三、结论

细胞培养技术作为现代生物学和生物工程技术的重要组成部分，在医学、生物工程等领域有着广泛的应用前景。随着科学技术的发展，细胞培养技术将不断完善和提高，为生命科学研究和生物工程技术应用提供更加全面和高效的技术支持。